Apoptoz, hücre ölümünün ana biçimlerinden biridir ve çok sayıda hastalık ve biyolojik süreçle ilişkilidir; yılda 30.000’den fazla bilimsel yayın apoptozdan bahsetmektedir. Bu nedenle, apoptoz markerlarının doğru ölçümünü sağlamak, hastalık mekanizmalarını ve ilaçların etkilerini anlamak için çok önemlidir. Abcam olarak, apoptotik yolları etkili bir şekilde ölçmek için kapsamlı bir ürün yelpazesi sunuyoruz. TUNEL testlerinden kaspaz aktivite tespitine kadar, ürünlerimiz size her zaman kesin ve güvenilir sonuçlar sağlamak için tasarlanmıştır. İster bölünmüş Kaspaz 3, Sitokrom C’ye ister Kaspaz 7, 8 ve 9’a odaklanın, apoptoz deneyleriniz için tüm çözümlerimiz mevcuttur.
Apoptoz test kitlerimiz ve reaktiflerimiz, membran asimetrisi kaybından DNA fragmantasyonuna kadar tüm ana apoptoz aşamalarını kapsar. Yaygın olarak kabul edilen ve binlerce yayında kullanılan basit yöntemleri kullanırlar. Testlerin okuması, flow sitometri, plaka okuyucular, floresan mikroskoplar ve diğer yaygın araçların en yaygın mevcut türleri kullanılarak uygulanabilir. Apoptoz tespit ürünlerimiz, TUNEL boyama kitleri, Annexin V boyama solüsyonları ve çeşitli Kaspaz aktivite analizleri, antikorlar, rekombinant proteinler ve daha fazlasını içermektedir. Yelpazemizdeki her bir araç, eşsiz doğrulukla apoptoz yolaklarını takip etmeye yönelik araştırmanızı desteklemek için tasarlanmıştır. Odağınız ister Annexin V boyama kullanarak erken evre tespiti üzerine olsun ister bölünmüş kaspaz 3 gibi ileri safha apoptoz markerları üzerine olsun, ürünlerimiz, apoptoz ilerlemesini ve apoptoz mekanizmasını izleme yeteneğinizi arttırır.
Apoptoz analizi ürünlerimizin araştırmanızda yaratacağı farkı keşfedin. Bugün kapsamlı ürün yelpazemizi inceleyin ve temel apoptotik markerları ve yolaklarını ölçmek için mükemmel çözümü bulun. TUNEL analizleri, kaspaz analizleri ve Sitokrom C ölçüm araçları dahil olmak üzere geniş yelpazede tespit kitleriyle, her adımda araştırmanızı desteklemek için buradayız.
Hücre sağlığı hakkında daha derinlemesine bilgi edinmek, hücre canlılığını, sitotoksisiteyi, mitokondriyal işlevi, çeşitli kaspazların rollerini değerlendirme yöntemlerinin arka planını öğrenmek ve daha fazlası için, Hücre Sağlığı Kılavuzumuzu indirin.
Annexin V analizleri
Apoptozun en erken aşamalarından biri, normalde plazma membranının hücre içi tarafıyla sınırlandırılan fosfatidilserinin dış plazma membranına taşındığı membran asimetrisi kaybıdır.
Annexin V, fosfatidilserine bağlanan bir memeli proteinidir. Floresan boya konjugeli Annexin V, akış sitometri ve floresan mikroskobu kullanılarak fosfatidilserini tespit etmek için yaygın olarak kullanılır. Boya konjugeli Annexin V yalnızca, fosfatidilserinin dış plazma membranına taşınmış olduğu hücrelere bağlanır.
Annexin V FITC apoptoz boyama kitimiz (ab14085), en yaygın kullanılan Annexin V testimizdir. Membranlarının bütünlüğünü kaybetmiş olan ölü hücreleri tespit etmek için bir optimize bağlama tamponu, propidyum iyodür ve kapsamlı bir protokol içerir. Hücreler, 5 dakikalık tek bir boyama adımıyla bağlama tamponunda yeniden süspanse edilir, ardından bir akış sitometri veya floresan mikroskobu kullanılarak tespit edilir.
Annexin V assayleri ve ürünleri yelpazemizin tamamını keşfetmek için tıklayın.
Öne çıkan ürünler:
Annexin V-FITC Apoptosis Staining / Detection Kit
- 2006’dan beri 500’den fazla bilimsel yayında kullanılmıştır.
- Kullanışlı ve eksiksiz apoptoz assay kitidir.
10X Annexin V/ANXA5 Binding Buffer
- ab14085’de kullanılan optimize Annexin V bağlama tamponu
- Floresan boya, floresan protein ve biyotin Annexin V konjugatları için uygundur.
Annexin V/ANXA5-FITC Apoptosis Detection Reagent
ab14085’de kullanılan Annexin V FITC konjugatı
TUNEL analizleri ve DNA fragmantasyonu
DNA fragmantasyonu, ileri safha bir apoptoz markerıdır ve yaygın olarak bir agaroz jel kullanarak DNA’nın izolasyonu ve parçacıkların gözlemlenmesi veya bir TUNEL analizi ile tespit edilir.
TUNEL analizleri, apoptozun karakteristik bir göstergesi olan DNA fragmantasyonunu tespit için yaygın olarak kullanılan bir yöntemdir. Bu teknikte, bir terminal deoksinükleotidil transferaz enzimi, etiketli deoksinükleotidleri parçalanmış DNA ipliklerinin uçlarıyla birleştirir. Alternatif olarak, apoptotik hücreler, propidyum iyodür gibi bir floresan boya çalıştırılarak, akış sitometri kullanılarak azaltılmış DNA içeriğine sahip hücrelerin ölçülmesiyle tanımlanabilir. Bu yaklaşım, DNA parçacıklarını kaybetmiş olan hücrelerin tespitini sağlar, böylece yüksek özgüllüğe sahip apoptotik hücrelerin belirlenmesine olanak tanır. DNA fragmantasyonu, apoptoz süresince nükleazların aktivasyonunun bir sonucu olarak meydana gelir ve çift iplikli kırılmaların oluşmasına neden olur. Bu kırılmaların tespit edilmesiyle, TUNEL analizleri, araştırmacıların çeşitli hücre popülasyonlarındaki apoptozun boyutunu ve ilerlemesini takip etmesine olanak tanır.
TUNEL analizleri, özellikle DNA fragmantasyonunun daha belirgin olduğu apoptozun ileri safhalarını takip etmek için faydalıdır. Dokular ve hücre kültürleri gibi bir dizi numune üzerinde kullanılabilir, bu da onu ileri safha apoptoz tespiti için çok yönlü bir araç haline getirir. Kaspaz aktivitesi ve membran değişimleri gibi diğer apoptoz markerlarıyla eşleştiğinde, TUNEL boyama, hücre ölümünün ve onun altında yatan mekanizmaların kapsamlı bir görüntüsünü sağlar.
TUNEL analiz kitlerimiz, parafine gömülü doku kesitleri, donmuş doku kesitleri, yapışık ve süspansiyon hücre kültürleriyle ve lamlara sabitlenmiş tek hücre süspansiyonlarının preparatlarıyla kullanım için uygundur. Tespit, geleneksel ışık mikroskobu, floresan mikroskop veya akış sitometri ile uygulanır.
TUNEL assayleri ve ürünleri yelpazemizin tamamını keşfetmek için tıklayın.
Öne çıkan ürünler:
Apoptosis DNA Ladder Assay Kit
- Parçalanmış DNA’nın kültürü yapılmış hücrelerden saflaştırılması için kit
- Basit analiz- bir agaroz jel üzerinde saflaştırılmış DNA parçacıklarını çalıştırın
- Süspanse edilmiş ve yapışık hücre kültürleri için uygun
- Flow sitometri veya floresan mikroskop ile analiz
- TUNEL-pozitif ve TUNEL- negatif kontrol hücreleriyle tedarik edilir.
- Donmuş ve parafine gömülü hücre kesitleri ve lamların üzerinde kaplanmış hücreler için uygundur.
- Geleneksel ışık mikroskobuyla analiz
- 200’den fazla bilimsel yayında kullanılmıştır.
Kaspaz analizleri
Kaspazlar, apoptozun gerçekleşmesinde merkezi bir rol oynayan bir proteaz ailesidir. Bu enzimler hem intrinsik hem de ekstrinsik apoptoz yolaklarında kilit rol oynayan Kaspaz 3, 7, 8 ve 9’u içerir. Kaspaz analizleri genellikle, aktif kaspazlarla bölündüğünde floresan veya kolorimetrik hale gelen substratlar kullanılmasını içerir, bu da araştırmacıların apoptozu gerçek zamanlı olarak ölçmesine olanak tanır. Bu analizler, belirli kaspazların aktivitesini tespit ederek, belli bir hücre popülasyonundaki apoptozun hangi yolaklarda bulunduğunu netleştirmeye yardımcı olabilir.
Bölünmüş kaspaz 3, özellikle, bir hücrenin geri döndürülemez ölme kararlılığını gösterdiğinden, sıklıkla bir apoptoz markerı olarak kullanılır. Kaspaz 3; Kaspaz 8, Kaspaz 9 veya granzim B ile bölünmesiyle aktif hale getirilir. Bölünmüş Kaspaz 3, daha sonra aşağıdakilere dayalı analizler kullanılarak tespit edilebilir:
- Bölünmüş kaspaz 3’e özgü antikorlar
- Kaspaz enzim substratları
- Aktif kaspaz 3 ile bölünen proteinlerin analizi, örnek vermek gerekirse PARP-1.
Kaspaz 8 ve kaspaz 9 gibi diğer kaspazlar, apoptozun dış sinyaller yoluyla mı (ekstrinsik apoptoz) yoksa mitokondriyal yolaklar yoluyla mı (intrinsik apoptoz) başlatıldığını belirlemeye yardımcı olur. Kaspaz analizleri, bu yolakların parçalara ayırıp incelenmesi ve programlanmış hücre ölümüne yol açan moleküler, etkinlikleri daha iyi anlamak için gereklidir.
Kaspaz analizleri ürün yelpazemiz, ELISA’ları, western blot ve görüntüleme için antikorları, rekombinant proteinleri ve plaka okuyucular ve akış sitometri kullanılarak ölçüm için uygun substrat kitlerini içerir. Araçlarımız, araştırmacılarımızın apoptozda Kaspaz aktivasyonu konusunda kapsamlı bir bakış açısı edinmelerine olanak tanır.
Kaspaz assayleri ve ürünleri yelpazemizin tamamını keşfetmek için tıklayın.
Öne çıkan ürünler:
Anti-Cleaved Caspase-3 antibody [E83-77]
- İnsan numunelerinin kullanıldığı Western blot ve floresan mikroskop için uygundur.
- 600’den fazla bilimsel yayında kullanılmıştır.
Caspase-3 Assay Kit (Colorimetric)
- DEVD-pNA substratının bölünmesi, kolorimetrik plaka okuyucuda okuma ile p-NA’yı serbest bırakır.
- DEVD substratı Kaspaz 7 aktivitesini de tespit eder.
- 300’den fazla bilimsel yayında kullanılmıştır.
Cleaved Caspase-3 Staining Kit (FITC)
- FITC-DEVD-FMK Kaspaz inhibitörü, Kaspaz 3 ve 7’ye bağlanır.
- Floresan mikroskop, flow sitometri veya florometrik plaka okuyucu ile tespit
Mitokondriyal membran potansiyeline bağlı boyalar
Mitokondriyal membran potansiyeli (Δψm) apoptozda oldukça önemli bir rol oynar ve bu potansiyeldeki değişikliklerin ölçülmesi, intrinsik apoptotik yolakta önemli bir olay olan mitokondriyal disfonksiyonu hakkında fikir verir. Mitokondriyal membran potansiyeline bağlı boyalar, bu değişikliği izlemek için yaygın olarak kullanılır. Bu boyalar, membran potansiyeline bağlı olarak mitokondride birikir ve membran potansiyeli çöktüğünde, apoptozun başlamasını göstererek, boya ya birikemez ya da dışarı yayılır ve boyanın floresanı o zaman ölçülebilir. Bu, mitokondriyal potansiyel kaybını tespit ederek, araştırmacıların DNA fragmantasyonu veya kaspaz aktivasyonu gibi diğer markerlar belirgin hale gelmeden önce erken apoptoz olaylarını gözlemleyebilmesini sağlar.
Bu boyaların kullanılması, programlanmış hücre ölümünde mitokondriyal katılımın daha derin bir şekilde anlaşılmasını sağlayarak, erken aşamalarda apoptoza uğrayan hücrelerin tanımlanmasına yardımcı olur. Bu, özellikle mitokondriyal sağlığa, ilaç toksisitesine ve apoptozun önemli bir rol oynadığı nörodejeneratif hastalıklara odaklanan çalışmalar için faydalıdır. Bununla birlikte, mitokondriyal membran potansiyeli kaybı yalnızca bir apoptoz markerı değildir; ayrıca diğer hücre ölümü türleriyle de ilişkilidir.
Abcam, mitokondriyal sağlık ve fonksiyonların incelenmesi için kapsamlı bir dizi test, araç ve reaktif sunmaktadır.
Öne çıkan ürünler:
TMRE-Mitochondrial Membrane Potential Assay Kit
- Florometrik mikroplaka okuyucuları, floresan mikroskop ve flow sitometri için uygundur.
- TMRE boyası, nispeten negatif yükü nedeniyle mitokondride tutulur, depolarize edilmiş mitokondri boyayı tutmaz.
JC-10 Mitochondrial Membrane Potential Assay Kit (Microplate)
- JC-10, mitokondriyal membran potansiyeli arttıkça turuncu kümeler oluşturur.
- Sinyal yeşilden (kümelenmemiş) turuncuya (kümelenmiş) kayar.
JC-10 Mitochondrial Membrane Potential Assay Kit (Flow Cytometry)
- Flow sitometri için formüle edilmiş tamponlarla aynı JC-10 boyası.
Sitokrom C salınımı assayleri
Sitokrom C’nin mitokondriden salınımı, intrinsik apoptotik yolakta oldukça önemli bir olaydır. Sitokrom C sitozole salındığında, apoptotik proteaz aktive edici faktör-1 (Apaf-1) ile etkileşime girer ve özellikle kaspaz 9 olmak üzere kaspazların aktivasyonunu başlatır. Sitokrom C salınımı analizleri, mitokondriyal bütünlük ve apoptoz başlangıcı hakkında bilgi sağlayan bu önemli adımı ölçmek için kullanılır. Bu analizler, genellikle hücrelerden sitozolik ve mitokondriyal fraksiyonların izole edilmesini ve Sitokrom c’nin varlığının western blot veya ELISA gibi yöntemlerle tespit edilmesini içerir.
Sitokrom C’nin salınımını takip ederek, araştırmacılar, mitokondriyal hasarın ne zaman ve nasıl meydana geldiğini saptayabilir, bu da apoptotik sürecin başlangıcına detaylı bir bakış sunar. Bu analizler, özellikle kanser araştırmalarında, nörodejeneratif hastalıklarda ve mitokondriyal disfonksiyonun genellikle merkezi bir rol oynadığı toksikoloji analizlerinde intrinsik apoptotik yolak incelemesi için gereklidir.
Western blot ve floresan mikroskobu için uygun tam bir sitokrom antikor setini, Sitokrom C’yi başarılı bir şekilde boyamak için gereken antikorları ve diğer reaktifleri içeren kitleri ve bir Sitokrom C rekombinant proteinini ürün portföyümüzde sunuyoruz.
Sitokrom C ürünleri yelpazemizin tamamını keşfetmek için tıklayın.
Öne çıkan ürünler:
Cytochrome c Apoptosis ICC Antibody Kit
- Floresan hücre görüntülemesinde Sitokrom c’yi boyamak için uygun antikor ve tampon seti
- Mitokondriyi boyamak için Kompleks Va’ya karşı bir antikor ile birlikte gelir.
Cytochrome c Release Assay Kit
- Sitozolik ve mitokondriyal fraksiyonların saflaştırılması için tam kit
- Western blotta Sitokrom C’yi ölçmek için bir primer antikor ile birlikte verilir.
Anti-Cytochrome C antibody [EPR1327]
- Rekombinant anti-Sitokrom C antikoru
- Fare, sıçan ve insan numunelerinde kullanım için uygundur.
- Western blot ve floresan görüntüleme için kullanılabilir.
