Deneyiniz için tek hücre bazında nicel ve nitel veriler sağlar.

ELISPOT (Enzyme-Linked ImmunoSpot), sitokinler, büyüme faktörleri veya antikorlar gibi salgılanmış proteinleri tek hücre düzeyinde tespit etmek ve ölçmek için geliştirilmiş olan ELISA tekniğiyle yakından ilişkili ve oldukça hassas bir immünolojik testtir.  ELISPOT testleri, ayrı ayrı aktif hale getirilmiş veya yanıt veren hücrelerin salgı ürününün görselleştirilmesine olanak sağlar.  Testte gelişen her nokta, tek bir reaktif hücreyi temsil eder. Tek hücre seviyesinde, bağışıklık tepkisine faydalı bilgiler sağlarlar ve immünoloji ve aşı araştırmalarında gereklidirler.

ELISPOT çoğunlukla aşı geliştirilmesi, viral enfeksiyon, enfeksiyon hastalıkları, otoimmün hastalıklar ve diğer alanlarda Th1/Th2 yanıtını araştırmak için de kullanılır.

Abcam’ın ELISPOT kitleri, tek bir hücre süspansiyonunda araştırılan proteinin üretimi ve salgılanmasının kalitatif ölçümü için tasarlanmıştır. ELISPOT testi, kit üretimi sırasında veya laboratuvarda PVDF tabanlı 96 kuyulu bir mikrotitre plakasının kuyularına kaplanan, ilgi duyulan analit için oldukça spesifik bir yakalama antikoru içerir. Plaka daha sonra antikora bağlı olmayan spesifik olmayan bağlanmayı en aza indirmek için bloke edilir ve yıkanır. Hücre süspansiyonu ve uyarıcı eklenir ve plaka inkübe edilerek spesifik antikorların üretilen herhangi bir analite bağlanması sağlanır. Daha sonra hücreler, daha önce yakalanan analite bağlanan Biyotinlenmiş tespit antikorlarının eklenmesinden önce yıkanarak çıkarılır. Daha sonra enzim konjuge streptavidin tespit antikorlarına bağlanarak eklenir. İnkübasyon ve yıkamanın ardından, substrat kuyucuklara uygulanır ve bu da uygun analiz yazılımı kullanılarak veya mikroskop kullanılarak manuel olarak ölçülebilen renkli noktalarla sonuçlanır.

ELISPOT testi, invivo ortama yakın koşullarda ve minimal hücre manipülasyonuyla tek hücre seviyesinde T hücrelerinden sitokin ve diğer çözünür molekül üretimi ve salgılanmasının analizi için oldukça spesifik bir immünolojik testtir. Bu teknik, sitokin üreten hücrelerin belirli bir uyarım altında sıklığını belirlemek ve bu sıklığın spesifik bir tedavi veya patolojik durumla karşılaştırılması için tasarlanmıştır.

ELISPOT testi Th1/Th2 tepkilerinin araştırılması, aşı geliştirme, viral enfeksiyon izleme ve tedavisi, kanseroloji, bulaşıcı hastalık, otoimmün hastalıklar ve transplantasyonda ideal bir araçtır.

Sandviç immüno-enzim teknolojisini kullanan Abcam ELISPOT testleri hem salgılanan sitokinleri hem de aynı anda birden fazla sitokin üreten tek hücreleri tespit edebilir. Hücre salgılanan sitokinler veya çözünür moleküller, üstte yüzen maddeye difüzyon, proteaz bozunumu veya çözünür membran reseptörlerine bağlanmadan kaçınan kaplanmış antikorlar tarafından yakalanır. Hücre çıkarıldıktan sonra, yakalanan sitokinler izleyici antikorlar ve uygun konjugatlar tarafından ortaya çıkarılır.

FLUOROSPOT kitlerimiz de aynı uygulamayı sağlar; fakat floresan deteksiyon yapıldığından daha fleksibl dır.

ELISPOT Kitlerinin Özellikleri

  • Yüksek Kaliteli Antikorlar: Spesifik ve yüksek afiniteli antikorlar, güvenilir sonuçlar elde edilmesini sağlar. Farklı türler ve alt türler için geniş bir antikor yelpazesi sunulur.
  • Farklı formatlar: İhtiyaçlarınıza uygun çeşitli plaka ve membran seçenekleri.
  • Otomasyon uyumluluğu: Yüksek verimli analizler için otomatik okuyucularla kullanılabilir.
  • Kullanıcı Dostu Protokoller: Detaylı ve anlaşılır protokoller, deneylerin kolaylıkla yapılabilmesini sağlar. Minimum deneyim gerektirir.

ELISPOT Kitlerinin Avantajları

  • Tek Hücre Seviyesinde Hassas Ölçüm: Her bir antikor üreten hücrenin bireysel olarak tespit edilmesini sağlar. Bu sayede, bir popülasyon içindeki farklı alt grupların aktivitelerini analiz etmek mümkün olur. Nadir hücre tiplerinin tespiti için idealdir.
 
  • Çoklu Analit Tespiti: Aynı anda birden fazla sitokin veya antikoru tespit edebilme yeteneği sunar. Bu özellik, immün yanıtın karmaşık doğasını daha iyi anlamamızı sağlar. Farklı immün hücrelerin aynı anda ürettiği farklı molekülleri analiz etmek için kullanılabilir.
 
  • Otomatik Veri Analizi: Elde edilen verilerin otomatik olarak analiz edilmesi, zaman tasarrufu sağlar. Yanlış pozitif veya negatif sonuç riskini azaltır. Büyük veri setlerinin yönetilmesini kolaylaştırır.
 
  • Geniş Uygulama Alanı:
    • Kanser: T hücresi yanıtının değerlendirilmesi, immünoterapinin etkinliğinin ölçülmesi gibi alanlarda kullanılır.
    • Otoimmün Hastalıklar: Otoantikor üretiminin tespiti, hastalığın ilerlemesinin takibi gibi alanlarda kullanılır.
    • Aşı Geliştirme: Aşı adaylarının etkinliğinin değerlendirilmesi, bağışıklık yanıtının kalıcılığının ölçülmesi gibi alanlarda kullanılır.
    • Allerjiler: Allerjenlere karşı gelişen immün yanıtın karakterizasyonu için kullanılır.
    • Enfeksiyon Hastalıkları: Virüs veya bakteriye karşı gelişen immün yanıtın değerlendirilmesi için kullanılır. 

Abcam ELISPOT Ürün Kataloğumuz

Paylaş:

Bu da ilginizi çekebilir

ELISPOT Kitlerinde %10 İndirim

ABCAM SEKONDER ANTİKORLARIN GÜCÜNÜ KEŞFEDİN

Abcam sekonder antikorları, eşsiz formülasyonları sayesinde son derece yüksek dilüsyon oranlarına sahip olmaları nedeniyle daha az ürün ile daha fazla çalışma solüsyonu hazırlamanıza olanak tanır.

Devam